Terapia różnicowania ostrej białaczki promielocytowej za pomocą tretinoiny (kwas all-trans-retinowy) ad 6

Wszystkie komórki, które były CD33 + i CD16- (promielocytów) całkowicie zniknęły w tym czasie, a wszystkie pozostałe komórki CD33 + znaleziono tylko w tej pośredniej populacji z podwójnymi barwnikami. Po tym piku zaczęły pojawiać się komórki, które były CD33-i CD16 + (granulocyty), przypadkowo ze zmniejszeniem średniej intensywności fluorescencji ekspresji CD33 na komórkach pośrednich (odzwierciedlając zmniejszenie liczby antygenów powierzchniowych w tej populacji dojrzewającej). Do 40 dnia nie zachowały się żadne komórki fenotypowo pośrednie. Morfologicznie, odkrycia te były wspierane przez sporadyczne obserwacje prętów Auer w komórkach, które w innym przypadku okazały się dojrzałymi neutrofilami polimorfojądrowymi, jak pokazano na Figurze 3A. Badania przedwczesnej kondensacji chromosomów i fluorescencji in situ hybrydyzacji
Dojrzewanie wynikające z badań morfologicznych i immunofenotypowych zostało potwierdzone przez wykazanie nieprawidłowości t (15; 17) na miejscu w tej samej populacji komórek. Ponieważ przedwczesna technika kondensacji chromosomów umożliwia kariotypową ocenę dojrzałych (niedzielących się) komórek, granulocyty uzyskane z krwi obwodowej w różnych momentach podczas leczenia badano pod kątem obecności tej nieprawidłowości klonalnej. Przykładowo, Figura 3B przedstawia wybarwienie Wright-Giemsy z populacji granulocytów uzyskane po odwirowaniu krwi obwodowej o dwóch gęstościach pobranej w dniu 21 od Pacjenta 3. Z 42 preparatów granulocytów-chromosomów analizowanych przez fluorescencyjną hybrydyzację in situ, 14 (33,3%). ) miał dowody na translokację chromosomu 17, pokazaną jako trzy jasne obszary fluorescencji na Figurze 3C. Pozostałe granulocyty od tego pacjenta (66,7%) nie ujawniły dowodów translokacji chromosomu 17, odpowiadającej dwóm normalnie fluorescencyjnym chromosomom na rysunku 3D. Po uzyskaniu pełnej remisji badano granulocyty krwi obwodowej od czterech innych pacjentów (pacjentów 1, 2, 6 i 9), ale nie znaleziono dojrzałych komórek wykazujących translokację chromosomu 17.
Łącznie wyniki markera powierzchniowego i fluorescencyjnego in situ hybrydyzacji wskazują, że składnik klonu białaczkowego został zaindukowany w celu utworzenia dojrzałych komórek we wczesnej fazie leczenia tretinoiną. Komórki te jednak zmarły po osiągnięciu dojrzałości, a remisja była związana z preferencyjnym odrostem normalnych elementów mieloidalnych. W granicach czułości tych technik nie znaleźliśmy żadnych dowodów na to, że są klonalne
nieprawidłowości utrzymywały się w dojrzałej populacji komórek podczas całkowitej remisji.
Analiza molekularna RAR-.
Dziewięciu pacjentów można było ocenić za pomocą analizy Northern blot przeprowadzonej na całkowitym komórkowym RNA. (Z powodu niewystarczającej wydajności RNA, dwóch wczesnych pacjentów nie mogło być ocenionych za pomocą tej techniki.) Osiem z tych dziewięciu pacjentów miało nieprawidłową ekspresję RAR-. w mRNA (Tabela 1). Wszystkich ośmiu pacjentów z nieprawidłowym przesłaniem dla RAR-. w analizie Northern wykazało pełną remisję po leczeniu tretinoiną. Siedmiu z tych ośmiu pacjentów miało również charakterystyczną nieprawidłowość kariotypową t (15; 17). Okazało się jednak, że u jednego pacjenta, który miał prawidłowy kariotyp w konwencjonalnej analizie cytogenetycznej, stwierdzono ekspresję nieprawidłowych gatunków mRNA dla RAR-. w analizie Northern blot, a pacjent ten również osiągnął całkowitą remisję
[przypisy: internista prywatnie wrocław, kreatynina badanie cena, korona protetyczna cena ]